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選擇真核細胞轉(zhuǎn)染試劑要考慮哪些因素

更新時間:2022-08-30      點擊次數(shù):887
  轉(zhuǎn)染是采用除病毒感染外的其他方法將核酸(DNA或RNA)人工導入細胞的過程。采用各種化學、生物學或物理方法導入外源性核酸會改變細胞的特性,從而實現(xiàn)細胞基因功能和蛋白質(zhì)表達研究。轉(zhuǎn)染后,導入的核酸可以瞬時性地存在于細胞內(nèi),只表達一段時間且不會復制,也可以穩(wěn)定地整合至受體基因組內(nèi),隨著宿主基因組的復制而復制,各種基因輸送系統(tǒng)采用的術(shù)語與該領(lǐng)域的技術(shù)進展步調(diào)一致,并進一步區(qū)分不同的方法和細胞類型。
  轉(zhuǎn)染技術(shù)作為一種分析工具,可將外源基因?qū)胝婧思毎兄跈C體表征遺傳、蛋白質(zhì)合成、細胞生長和發(fā)育等功能的研究。慢病毒載體,腺病毒載體和逆轉(zhuǎn)錄病毒載體等病毒傳遞系統(tǒng)可用于轉(zhuǎn)運DNA或RNA到目的細胞中。病毒介導的轉(zhuǎn)染技術(shù)整合效率高,但存在一定的生物安全隱患,且轉(zhuǎn)染的準備程序比較復雜,對細胞類型有很強的選擇性。此外,在進行病毒轉(zhuǎn)染之前,需要考慮幾種限制因素,如病毒載體的裂解性質(zhì),細胞系包裝和宿主細胞特異性等。
  理想的核酸轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)該是高效、安全、簡單、省時和經(jīng)濟的。隨著轉(zhuǎn)染方法的不斷發(fā)展以及轉(zhuǎn)染實驗日益增加,選擇適合的轉(zhuǎn)染試劑以達到轉(zhuǎn)染效率顯得尤為重要。在考慮合適的真核細胞轉(zhuǎn)染試劑時,應(yīng)首先確定測定的細胞類型和培養(yǎng)條件。罕見的細胞培養(yǎng),如神經(jīng)元和原代細胞等通常難以轉(zhuǎn)染,因此可能需要能促進轉(zhuǎn)染的試劑。此外,在選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑之前,還應(yīng)該考慮試劑水平和細胞毒性參數(shù)。
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