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當(dāng)前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > PCR&q-PCR > q-PCR > AN19L021/AN19L022LyGreen HRM專用染料(20×in water)

LyGreen HRM專用染料(20×in water)

簡(jiǎn)要描述:LyGreen HRM專用染料(20×in water)是一種新型的的雙鏈DNA結(jié)合飽和熒光染料,是新一代用于HRM分析的熒光染料,也可用于實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)。

  • 產(chǎn)品型號(hào):AN19L021/AN19L022
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-08-06
  • 訪  問  量:2589

詳細(xì)介紹

品牌其他品牌貨號(hào)AN19L021/AN19L022
規(guī)格1ml供貨周期現(xiàn)貨
主要用途新一代用于HRM分析的熒光染料,也可用于實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)。應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)

產(chǎn)品描述

LyGreen核酸染料是一種新型的的雙鏈DNA結(jié)合飽和熒光染料,是新一代用于HRM分析的熒光染料,也可用于實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)。該染料結(jié)構(gòu)上由兩個(gè)單體染料分子通過一個(gè)彈性臂連接成一個(gè)二聚體,在沒有DNA存在時(shí),該結(jié)構(gòu)呈無(wú)熒光環(huán)狀結(jié)構(gòu),一旦有DNA出現(xiàn),則恢復(fù)隨機(jī)形態(tài)并與DNA結(jié)合發(fā)出強(qiáng)烈的綠色熒光。
與市場(chǎng)上其他熒光染料如SYBR Green I 相比,LyGreen具有如下優(yōu)點(diǎn):(1靈敏度高:在推薦濃度下使用時(shí)可以獲得比SYBR Green I 更強(qiáng)的信號(hào)2準(zhǔn)確:結(jié)合雙鏈DNA,變形時(shí)染料不遷移,熒光信號(hào)準(zhǔn)確反映雙鏈DNA變化情況。過量染料形成二聚體,而不游離,使得LyGreen對(duì)PCR的抑制遠(yuǎn)小于SYBR Green I,因此,使用LyGreen進(jìn)行的qPCR實(shí)驗(yàn)可以使用快速PCR步驟。3穩(wěn)定性:在正常的儲(chǔ)存、操作和PCR過程中不會(huì)被破壞。在緩沖溶液中的染料可以安全的儲(chǔ)存在室溫或冰箱里,也可以反復(fù)凍融。4安全:細(xì)胞膜穿透性測(cè)試表明,LyGreen幾乎不能穿透細(xì)胞膜。(5兼容性:和SYBR Green I 光譜相似,使用不同品牌qPCR儀器時(shí)不改變光譜元件設(shè)置,也無(wú)需改變操作步驟,qPCR完成后,無(wú)需加入其它核酸染料便能直接在凝膠成像系統(tǒng)下觀察分析。6重復(fù)性好(如圖1):特殊設(shè)計(jì)染料,相同反應(yīng)體系下,熒光信號(hào)釋放僅與雙鏈濃度有關(guān),優(yōu)秀線性。
應(yīng)用實(shí)例

圖1. LyGreen染料用于綿羊FecB基因HRM分析.


HRM分析設(shè)備為L(zhǎng)ightCycler@480熒光定量PCR儀(德國(guó)羅氏)
訂購(gòu)信息


產(chǎn)品名稱貨號(hào)規(guī)格
LyGreen HRM專用染料(20×in water)AN19L0211 mL
LyGreen HRM專用染料(20×in water)AN19L0225*1 mL


運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。-20 oC干燥避光保存,有效期12個(gè)月。
光學(xué)性質(zhì)
激發(fā)波長(zhǎng)= 497 nm
發(fā)射波長(zhǎng)= 520 nm
使用方法
PCR反應(yīng)的配制(50 μL)

試劑用量
ddH2O計(jì)算加水量,按終體積50 μL
Taq DNA poLymerase5 U
2mM的 dNTP5 μL
50mM MgCl22.5 μL
20 X LyGreen2.5 μL
引物0.1-1 μM(終濃度)

注意事項(xiàng)

  1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

  2. 請(qǐng)根據(jù)不同的儀器類型,不加入或加入合適濃度的參比染料ROX。該體系需根據(jù)所使用的Taq酶的不同進(jìn)行適當(dāng)優(yōu)化。

  3. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量于冰上向無(wú)菌離心管中依次加入水,Taq poLymerase buffer, dNTPs, MgCl2, LyGreen, Taq poLymerase, and primers等配制qPCR反應(yīng)體系(1×Master mix)。

  4. 將1×Master mix 適量分裝至無(wú)菌PCR管中,并加入DNA (50 ng/反應(yīng))。

  5. 按照儀器類型選擇合適的擴(kuò)增程序。

  6. 做qPCR時(shí)注意設(shè)置陽(yáng)性和陰性對(duì)照。

  7. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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